Portal de Eventos CoPICT - UFSCar, XXVII CIC e XII CIDTI

Tamanho da fonte: 
OTIMIZAÇÃO DO CULTIVO IN VITRO DO TECIDO NERVOSO DE ABELHAS Apis mellifera africanizada
Victor Ribeiro Sales, Patricia Azevedo, Roberta Cornélio Ferreira Nocelli

Última alteração: 2021-02-25

Resumo


As abelhas são insetos pertencentes a ordem Hymenoptera, sendo considerados os principais agentes polinizadores, além de possuírem significativa importância por realizarem serviços ecossistêmicos que possibilitam a reprodução cruzada, favorecendo a conservação e a diversidade de espécies vegetais. Apesar dessa significativa contribuição, tem-se acompanhado um grande declínio na população de abelhas, ocasionado principalmente pelas ações antrópicas a partir da perda de habitats, mudanças climáticas, introdução de espécies exóticas, e principalmente pelo uso indiscriminado de agrotóxicos. Esses agentes químicos podem impactar as abelhas de forma instantânea, ou provocar alterações a longo prazo. Desta forma torna-se fundamental identificar os reais impactos que esses agentes causam no organismo desses insetos, em nível celular, por meio da utilização de técnicas de cultura in vitro. Entretanto, para o estabelecimento dessas técnicas algumas lacunas ainda precisam ser preenchidas. Estudos recentes conseguiram estabelecer parâmetros confiáveis para cultura in vitro a qual qualificaram o meio de cultura Leibovitz’s como o mais efetivo para o desenvolvimento da técnica, porém ainda faltam suplementações para a otimização da cultura. Sendo assim, faz-se válido avaliar novas suplementações ao meio de cultura já padronizado, como o ácido pirúvico, buscando a sua otimização. Diante disso, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o cultivo in vitro do tecido nervoso de abelha Apis mellifera africanizada, com diferentes concentrações de ácido pirúvico no meio Leibovitz’s previamente padronizado. Para a realização da técnica e das avaliações histológicas, é necessário a preparação do material para a aquisição das imagens. As abelhas foram coletadas de um apiário selecionado, posteriormente foram submetidas ao processo de dissecção para a retirada do tecido nervoso, e após o processo, o órgão foi transferido para o meio de cultura para células de inseto Leibovitz’s, com diferentes concentrações de piruvato, dentre elas 0,55 g/L; 0,69 g/L; 0,83g/L; 0,97 g/L; 1,11 g/L; 1,25 g/L. Em seguida, o órgão foi emblocado para passar pelo processo de corte e montagem de lâminas envolvendo o micrótomo, e ao final das secções do tecido, o mesmo foi disposto em lâminas que seguiram para o processo de coloração por Hematoxilina-Eosina. Após o processo de coloração, as lâminas foram montadas permanentemente e seguiram para a fase de análise com o auxílio do microscópio de luz. O método aplicado no trabalho foi derivado de um projeto de mestrado intitulado ‘’Padronização do cultivo in vitro do tecido nervoso de abelha Apis mellifera africanizada’’, porém devido ao agravamento da pandemia do coronavírus e as medidas de distanciamento social propostas, as atividades laboratoriais de pesquisa foram suspensas por tempo indeterminado para garantir a integridade e a saúde de todos os pesquisadores, dificultando a execução e obtenção dos resultados da pesquisa e impedindo a conclusão do referente projeto. Apesar dos impedimentos para a finalização, conclui-se que o período dedicado a iniciação cientifica foi crucial para a formação do graduando, uma vez que pode aprender técnicas laboratoriais de dissecção, coloração, análises histológicas e conhecimento acerca da escrita e apresentação cientifica. Assim que a utilização do laboratório voltar ao normal a análise das lâminas será concluída.


Palavras-chave


abelha melífera, avaliação de risco, avaliação de toxicidade, padronização

Referências


AZEVEDO, P.; BUTOLO, N.P.; ALENCAR, L.D.; SOARES-LIMA, H.M.; SALES, V.R.; MALASPINA, O.; NOCELLI, R.C.F. Standardization of in vitro nervous tissue culture for honeybee: A high specificity toxicological approach. Ecotoxicology And Environmental Safety, Rio Claro. Fev. 2020

POTTS, S.G. et al. Global pollinator declines: trends, impacts and drivers. Trends In Ecology And Evolution, Reading, v. 25, n. 6, p.345-353, 25 fev. 2010.

POTTS, S.G. et al. Safeguarding pollinators and their values to human well-being. Nature. p.220-229, 28 nov. 2016.