Introdução

As cavernas, em especial a zona afótica, apresentam condições extremas que dificultam o desenvolvimento e crescimento dos microrganismos. Esses ambientes são ideais para obtenção de linhagens fúngicas produtoras de enzimas com alto potencial biotecnológico. Atualmente, a degradação da celulose visando a produção de biocombustíveis de segunda geração, está no centro das pesquisas de produção de energia renovável, pois se apresentam como alternativa menos impactante ao ambiente quando comparada aos combustíveis fósseis. Dois artigos foram publicados pelo nosso grupo de pesquisa demonstrando a alta atividade celulolítica de fungos filamentosos isolados da Gruta do Catão, São Desidério – BA. Nesses trabalhos, duas linhagens se destacaram por apresentar maior atividade de endoglucanase e celulase total quando comparadas à linhagem padrão Aspergillus niger 3T5B8 utilizada pela Embrapa. Diante do alto potencial de degradação da matéria lignocelulósica que essas linhagens fúngicas apresentaram, este projeto tem por finalidade a bioprospecção de novas espécies de fungos filamentosos produtores de enzimas celulolíticas isolados de amostras de sedimento da zona afótica da caverna da Angélica, Parque Estadual de Terra Ronca – GO.

Objetivos

ü  Avaliar a produção de enzimas celulolíticas por linhagens de fungos filamentosos isoladas do sedimento da zona afótica da caverna da Angélica, situada no Parque Estadual de Terra Ronca (PETeR), GO.

Metodologia

Para o isolamento dos fungos foi utilizado o método de diluição seriada da suspensão da amostra de substrato da caverna e inoculação em meios de cultura específicos. A seguir, cada linhagem pura foi inoculada por picada no centro de uma placa de Petri contendo Ágar Sabouraud e incubadas em BOD por 7 a 15 dias.

Para a descrição das colônias foram consideradas características macroscópicas como: Velocidade de crescimento, tamanho, morfologia, esporulação, cor, presença de cromogênese e formação de exudato.

Para avaliar o potencial celulolítico das linhagens, colônias puras foram inoculadas por picada no centro da Placa de Petri contendo um meio de cultura sintético com carboximetilcelulose (CMC) como única fonte de carbono. As linhagens fúngicas que mais apresentaram formação de halo de degradação foram testadas quanto à produção de enzimas celulolíticas em cultivo submerso, o sobrenadante do cultivo foi utilizado como extrato bruto enzimático para as análises de expressão das celulases e determinação do teor protéico.

Resultados

• Das 45 linhagens de fungos obtidas, 34 obtiveram resultado positivo para o teste de degradação de celulose. Duas linhagens (04 e 08) foram separadas;
• A linhagem SDC 2.8 (Aspergillus sp.8) foi utilizada como padrão para comparação de valores;
• Todos os testes enzimáticos com as linhagens isoladas da caverna da Angélica mostraram-se positivos;
• Das duas linhagens separadas, uma se destacou em todos os testes de quantificação enzimática, ultrapassando, em alguns momentos, os resultados da SDC 2.8 (Aspergillus sp.8).

Conclusões

• Ecossistemas cavernícolas possuem grande potencial de espécies microbiológicas com atividade celulolítica;
• Fungos filamentos possuem grande potencial de desenvolvimento e produção de enzimas celulolíticas;
• A pesquisa em bioprospecção de microrganismos extremófilos pode se tornar grande aliada da indústria e do meio ambiente.