INTRODUÇÃO: A bioluminescência é a emissão de luz fria visível a partir da oxidação de substrato conhecido por luciferina na presença de enzima conhecida por luciferase. Nos vagalumes, a bioluminesc~encia requer, além de uma luciferina benzotiazólica  uma luciferase e oxigênio, a presença dos cofatores ATP e magnésio,. É possível quantificar o número de bactérias em uma amostra de maneira rápida e eficaz utilizando métodos bioluminescentes. baseado na presença de ATP, em todas as células vivas. No ensaio tradicional, mistura-se a luciferase a D- luciferina de vagalumes, numa amostra de células lisadas onde o ATP é liberado. A intensidade de luz emitida é detectada em luminômetro, sendo proporcional a quantidade de ATP presente na amostra, que por sua vez é proporcional ao numero de células vivas presentes na amostra, que é. Dessa maneira, a possível determinar a biomassa microbiológica existente na amostra. O método de ATP-Bioluminescência é muito utilizado para teste de toxicidade, teste antibacteriano, antifúngico quantificação de bactérias em amostras humanas, como trato bucal e urinário, tendo sensibilidade já descrita em 1000 UFC/mL. OBJETIVOS: determinar a sensibilidade da luciferase recombinante do vagalume Amydetes vivianii, encontrado no campus de Sorocaba, na detecção de bactérias por método de bioluminescência. METODOLOGIA: Para a obtenção da curva padrão de UFC/mL x Densidade óptica em 600 nm(OD600), foram cultivadas células de E. coli XL1Blue  em meio LB acrescido de tetraciclina até a OD600 1,0. Realizou-se diluição seriada da cultura líquida até o título de 10^-7 UFC e as amostras foram plaqueadas em LB agar com tetraciclina para contagem de UFC/mL. Para a obtenção da curva padrão de [ATP] x atividade bioluminescente, mediu-se a atividade luminescente em counts por segundo (cps) da luciferase de A. vivianii em ensaios com concentrações de 5 x 10^-1 a 5 x 10^-7 mM no luminômetro AB 2200 (ATTO). Para a obtenção da curva de Nº de bactérias x Atividade bioluminescente lisou-se amostras com numero de bactérias conhecido usando o detergente neutro, Triton X-100, e mediu-se as atividades luminescentes. RESULTADOS: A curva de Nº de bactérias x O.D.600 mostrou-se que uma O.D.(600nm) corresponde a ~ 1,0 x 10⁸ bactérias/mL. Obteve-se então uma curva padrão de ATP x atividade luminescente da luciferase, mostrando um limite de detecção de até 10^-14 mols de ATP, onde 10^-14 mols/mL de ATP geram um sinal de ±10000 cps na presença de luciferase. Utilizando as duas curvas obtidas pode-se encontrar a concentração de ATP por UFC/mL, dessa forma o valor obtido foi de que cada UFC possui aprox. 10^-18 mols/mL de ATP. Assim, a sensibilidade deste método permitiu detectar um número mínimo  de aproximadamente 10³ bactérias/mL. CONCLUSÃO: A luciferase de A. vivianii mostrou uma sensibilidade para detectar até aproximadamente 1000 bactérias/mL em amostras líquidas, mostrando uma sensibilidade equivalente ou superior aos kits comerciais. Esse método poderia ser utilizado para medir biomassa microbiológica em uma amostra de água contendo acima de 10³ bactérias/mL. Assim, esta enzima se mostra promissora para o desenvolvimento de kits de detecção de ATP e biomassa altamente brilhante.